Luigi macht sich mit Mario und Freunden auf einen Traumurlaub, nachdem er eine Einladung in ein luxuriöses Hotel erhalten hat. Doch sein Traum wird schnell zum Albtraum, als König Buu enthüllt, dass alles nur ein Trick war, um Mario und seine Freunde zu fangen. Mit Hilfe von Professor I. Gidd durchquert der zögerliche und feige Held Luigi erneut die gefährlichen Stockwerke des nun unheilvollen Hotels, um sie zu retten.
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